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東京172亞株卡介苗(標(biāo)準(zhǔn)品)

產(chǎn)品時(shí)間:2022-03-08

簡(jiǎn)要描述:

NIBSC 07/272 東京172亞株卡介苗(標(biāo)準(zhǔn)品)由日本東京 BCG 實(shí)驗(yàn)室于 2006 年制備。2009 年被確定為東京 172 的第一個(gè) WHO 卡介苗參考試劑。本材料的預(yù)期用途是作為有效性和一致性的比較或參考活力檢測(cè)監(jiān)測(cè)(如培養(yǎng)活菌計(jì)數(shù)和改良的 ATP 檢測(cè));使用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行身份測(cè)定;以及在臨床前研究中用于評(píng)估新型結(jié)核病疫苗的體內(nèi)試驗(yàn)(如無毒力分枝桿菌、皮膚反應(yīng)性和保護(hù)試驗(yàn))。

世界衛(wèi)生組織參考試劑

東京 172 第一代世界衛(wèi)生組織卡介苗疫苗參考試劑

子株

NIBSC  07/272



血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。


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